冻存管作为生物样本低温保存的核心载体,广泛应用于细胞库、基因库、临床检验及生物医药研发中。其正确使用不仅关乎样本活性与完整性,更直接影响实验可重复性与数据可靠性。若操作不当,极易引发样本污染、管体爆裂、信息混淆或反复冻融损伤等风险。掌握
冻存管科学、规范的使用流程,是守护珍贵生物资源的关键步骤。

一、选用合规冻存管
材质要求:必须使用高纯度聚丙烯(PP)材质、耐-196℃低温的专业冻存管,确保在液氮或超低温环境下不脆裂;
密封性能:优选带硅胶O型圈或双重密封盖设计,防止冷凝水渗入或样本挥发;
容量匹配:常见0.5mL、1.8mL、2.0mL等规格,液体填充量不超过管体80%(如1.8mL管最多装1.4mL),预留冷冻膨胀空间。
二、规范标记与信息录入
标识:使用耐低温记号笔在管壁书写,或采用激光刻码、二维码标签,严禁仅贴纸质标签(易脱落、模糊);
信息完整:包含样本编号、类型、冻存日期、操作者、项目名称等关键字段;
同步电子记录:立即录入LIMS(实验室信息管理系统)或电子表格,实现双备份追踪。
三、样本分装与预处理
无菌操作:在生物安全柜内完成分装,避免微生物污染;
添加保护剂:对活细胞等敏感样本,需加入10%DMSO或甘油等冷冻保护剂,减少冰晶损伤;
程序降温:将冻存管先置于-80℃冰箱或专用程序降温盒(如Mr.Frosty)中,以约-1℃/min速率缓慢冷冻,再转移至长期存储设备。
四、冻存与取用操作规范
竖直放置:冻存管必须垂直插入冻存盒孔位,确保密封盖朝上,防止泄漏;
快速操作:从超低温环境取出时动作迅速,避免长时间暴露于室温;
一次性使用原则:解冻后未用完的样本不可再次冻存,防止反复冻融导致核酸降解或细胞死亡。