正确清洗凝胶滤膜是保障实验数据可靠性的必要措施

更新时间：2025-08-25

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　　凝胶滤膜作为尺寸排阻色谱（SEC）或脱盐纯化中的核心分离介质，其性能直接影响实验结果的准确性与重复性。随着使用次数增加，膜表面及孔道内易吸附蛋白质、脂类或颗粒杂质，导致通量下降、分离效率降低。因此，掌握正确的清洗方法，不仅是延长凝胶滤膜寿命的关键，更是保障实验数据可靠性的必要措施。

　　一、清洗原则：温和有效，防止损伤

　　凝胶滤膜多由交联葡聚糖、琼脂糖等亲水性高分子材料制成，结构脆弱，不耐高压、强酸、强碱或有机溶剂。清洗应遵循“低压力、适pH、防脱水”的原则，避免破坏其三维多孔网络结构。

　　二、常规清洗步骤

　　冲洗残留物

　　实验结束后，立即用至少5-10倍柱体积的去离子水或初始缓冲液冲洗系统，去除未结合的样品和盐分，防止沉淀堵塞孔道。

　　去除弱吸附物

　　使用0.1–0.5mol/LNaCl溶液冲洗，可有效清除因离子相互作用产生的非特异性吸附杂质，适用于大多数情况。

　　深度清洗（去蛋白）

　　对于蛋白质残留严重的情况，推荐使用含0.5–1mol/LNaOH的溶液进行清洗。碱性条件可水解并去除大多数有机污染物。注意：琼脂糖基滤膜可耐受0.5–1MNaOH（清洗时间≤30分钟），而葡聚糖基材料则不耐强碱，应避免使用。

　　去除脂类或疏水性杂质

　　可采用30%–70%的乙醇或异丙醇短时冲洗（≤1小时），但需注意有机溶剂可能导致部分凝胶收缩，冲洗后应充分用水平衡。

　　三、特殊清洗方案

　　变性剂清洗：对于顽固蛋白聚集体，可用6M尿素或4M盐酸胍溶液冲洗，随后逐步降低浓度平衡。

　　去垢剂辅助：添加0.1%–0.5%非离子型去垢剂（如TritonX-100或Tween-20）可增强脂蛋白去除效果，但需冲洗避免残留干扰后续实验。

　　四、保存与防干涸

　　清洗完成后，应将滤膜保存在20%乙醇或0.02%的缓冲液中，防止微生物滋生。切忌干燥保存，干涸会导致孔结构塌陷。

　　五、验证清洗效果

　　定期检测纯水通量（PWP）和标准蛋白的分离效率，判断膜性能是否恢复。